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常見結直腸癌動物模型和細胞株簡介

發布時間:2023-09-06 人氣:440 作者:天之恒

結直腸癌(Colorectal cancer,CRC)是一種起源于結腸或直腸內的惡性腫瘤。根據國家癌癥中心最新統計數據,我國結直腸癌發病率居惡性腫瘤第二位,死亡率居第四位,結直腸癌的治療方法通常包括手術切除、放療、化療和靶向治療等。手術切除是最常見的治療方法。放療和化療常常與手術聯合應用,以清除殘余癌細胞或控制腫瘤的擴散。靶向治療是一種針對特定癌癥細胞的治療方法,通過抑制細胞生長或破壞其發展的信號傳遞途徑來達到治療的效果。常見的化療藥物有5-氟尿嘧啶、奧沙利鉑、卡培他濱以及靶向治療藥物:如抗EGFR抗體(如西妥昔單抗,Cetuximab)和抗VEGF抗體(如貝伐珠單抗,Bevacizumab)等。

結直腸癌常用的動物模型

腫瘤模型對研究腫瘤生長的生物學過程和抗腫瘤治療藥物的研發非常重要。國內外建立結直腸癌動物模型的報道有很多,大體可以分為以下三種:

01╱ 化學誘導模型 ╱

發型結直腸癌模型多采用化學誘發途徑,常用的誘導劑有二甲基肼(dimethylhydrazine,DMH)氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)致炎劑葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodiuln, DSS)。DMH本身不致癌,但在肝細胞內質網被氧化成甲基氧化偶氮甲醇,隨膽汁進入腸腔,導致結直腸癌上皮癌變。AOM是DMH在肝臟的代謝產物,它通過DNA烷化,促進堿基的錯誤配對,導致腸癌的發生。

02╱轉基因小鼠模型╱

在結直腸癌研究中,轉基因小鼠模型可以模擬結直腸癌的發展和機制。以下是一些常見的轉基因腸癌小鼠模型:

1、APC Min/+ 小鼠模型是最常見的腸癌模型之一。其利用APC基因突變模擬人類腸癌中的APC基因突變。這個突變會影響Wnt信號通路的調控,導致細胞增殖異常,促進腫瘤的發展。APC Min/+ 小鼠會產生多發性腸道腺瘤,最終導致結腸腺癌的產生。這是一種遺傳模型,不能模擬所有腸癌的變異情況,但是研究腸道腫瘤發展和藥物治療評價非常有用的小鼠模型。

2、Villin-CreERT2;APC flox/flox 模型是另一種常用于研究腸癌的轉基因小鼠模型,它結合了Villin基因驅動的Cre酶表達和APC基因的floxed(flanked by loxP sites)序列,通過給予小鼠誘導劑(如tamoxifen)激活Cre酶,可以在特定時間點誘導APC基因的缺失,引發腸癌。該模型可以模擬腸癌的發展,并研究在特定時間點缺失APC基因對腸道腫瘤的影響。

3、LSL-K-ras G12D模型是一種用于研究腫瘤發展和癌基因K-ras的小鼠模型。K-ras G12D 的過度激活已與多種癌癥相關,包括肺癌和結直腸癌。這個模型為了激活K-ras G12D 突變,使用Cre酶來剪切loxP位點,從而激活K-ras基因的表達,促進癌癥的產生。該模型可用于研究K-ras G12D 在腫瘤發展中的作用。

03╱ 移植瘤模型 ╱

結直腸癌移植瘤模型主要分為三種:同源腫瘤移植瘤模型(Syngeneic)、人腫瘤細胞株異種移植模型(CDX)、患者來源的腫瘤異種移植模型(PDX)。

同源腫瘤移植瘤模型(Syngeneic)

常見的同源移植結直腸癌模型是使用結直腸癌細胞系在同種動物體內進行移植的模型。以下是一些常見的同源結直腸癌模型:

1、CT26 細胞系模型是一種常用于癌癥研究的小鼠同源移植結直腸癌模型。CT26細胞系最早由Balb/c小鼠的結腸腺癌組織中分離出來,將其接種于Balb/c小鼠構建而成的移植瘤模型被廣泛用于腫瘤生物學、藥物治療以及免疫治療研究等領域。

2、MC38 細胞系模型是一種用MC38細胞系在小鼠體內進行同源小鼠移植結腸癌模型。MC38細胞最早是由C57BL/6小鼠的結腸腺癌組織中分離獲得的,將其接種于C57BL/6小鼠構建而成的移植瘤模型常用于研究腫瘤生物學和腫瘤的免疫治療等。

3、CMT93 細胞系模型是用 CMT93 細胞系的同源小鼠移植結腸癌模型。CMT93 細胞系是從Balb/c 小鼠的結腸腺癌組織中分離獲得的細胞系,將其接種于Balb/c小鼠構建而成的移植瘤模型被廣泛用于實驗室研究,模擬小鼠結腸腺癌的發展等。

CDX模型(Cell Derived Xenograft)

CDX模型是指將人源腫瘤細胞株接種于免疫缺陷小鼠構建的腫瘤移植模型。接種部位主要是皮下接種和原位接種。皮下接種荷瘤小鼠模型耗時短、費用低、操作簡單,但很少出現轉移。原位接種荷瘤小鼠模型腫瘤生長微環境與現實更相似,但操作更復雜且易出現轉移。常見的結直腸癌細胞株CDX模型有HCT-116、SW620、SW480、Caco-2、HT-29、 COLO 205、 LS 180等。

PDX模型(Patient Derived Xenografts)

PDX模型是將患者來源的癌癥組織接種于免疫缺陷小鼠體內構成的模型。該模型保留了原發腫瘤的細胞和組織病理學結構,基因組和基因表達譜也很大程度被保留,對臨床療效的可預測性達到80%以上,是目前公認的準確性最高的腫瘤學研究模型。但由于PDX模型構建成本高,患者的癌組織或細胞不易獲得,成瘤時間長,成瘤率低等原因,因此PDX模型特別珍貴。南昌樂悠生物科技有限公司已成功構建了47腸癌PDX,為腫瘤基礎研究及抗癌藥物臨床前藥效評價提供了有效工具。



結直腸癌常用細胞株(Cell lines )

1、HCT-116 細胞株:來源于一名52歲男性患者結腸腺癌組織;屬于中等分化的細胞株;細胞通常呈現多角形的形態;基因譜表達CEA+,keratin+、TGF β 1+和TGF β 2 +; ras原癌突變基因。

2、SW620 細胞株:來源于一名51歲男性患者Dukes’C 型結腸腺癌大腸組織;與SW480是同一病人一年后復發的轉移灶,已轉移至淋巴結;基因譜表達CEA+、TGF β+、keratin+、myc+、myb+、ras+、fos+、sis+、p53+、abl-、ros-、src-、CSAp-和colon antigen 3-。

3、SW480 細胞株:來源于一名50歲白人男性患者的Duckes’C 型原位結腸腺癌組織;屬于相對較低分化的細胞株;細胞呈現典型的上皮細胞形態;基因譜表達CEA+、TGF β+、myc+、myb+、ras+、fos+、sis+、p53+、abl-、ros-、src- 及EGF+。

3、Caco-2 細胞株:來源于一名72歲的白人男性II期中等分化原位結腸腺癌患者的腫瘤組織;基因譜表達keratin+、Retinic acid binding protein 1+、retinol binding protein 2+。

4、HT-29 細胞株:來源于一名44歲白人女性患者的原位結腸腺癌組織;基因譜表達myc+、ras+、myb+、fos+、、sis+、 p53+、abl-、ros-、 src-;可合成IgA、CEA、TGFβ結合蛋白和黏液素,表達尿激酶受體;可合成IgA、CEA、TGFβ結合蛋白和黏液素,表達尿激酶受體。

5、LS174T 細胞株:是LS 180結腸腺癌細胞株用胰蛋白酶傳代的變異種,比親本更易傳代,能生成大量的癌胚抗原(CEA)。有豐富的微絲和細胞質黏液素液泡;抗原顯示colon cancer antigen 3+、p53-、keratin+;癌基因表達c-myc+、N-myc+、H-ras+、N-ras+、Myb+和fos+;可產生IL-10、IL-6和黏蛋白。

6、COLO 205 細胞株:來源于一名70歲白人男性Dukes’D型結腸腺癌患者的腹水;患者在取出標本之前已接受5-氟尿嘧啶治療4-6周;基因譜表達CEA+、keratin+、IL-10+。

7、LS180 細胞株:來源于一名58歲白人女性患者Duckes’B 型結腸腺癌組織;基因譜表達CEA+、IL10+、IL6+、mucin+;colon antigen 3-。

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